動物顯微注射的步驟介紹
更新時間:2021-06-07 點擊次數:3433
顯微注射是在高倍倒置顯微鏡下,利用顯微操作器,控制顯微注射針在顯微鏡視野內移動的機械裝置,用來進行細胞或早期胚胎操作的一種方法。
動物顯微注射步驟:
1、注射針內裝液:使用無菌的微量加樣器從微注射針的后部加入待注射樣品酚紅一滴。
2、注射針安裝和定位:
(1) 將裝液后的針頭的游離端安在連接器上,然后旋緊連接器以固定針頭,再將其固定到微操作儀的托針管上;
(2) 把載有待注射樣本的培養皿放在顯微鏡載物臺上,用低倍物鏡對準細胞調焦;
(3)移動針頭并在顯微鏡下調整微操作儀,直到針頭的陰影在視野的中心上方;
(4)使用工作用放大倍數,調準細胞焦距,找到針尖。
3、顯微注射:
(1)使針尖對準細胞的待注射部位(細胞與針尖在同一焦面上),旋轉推進旋鈕,針刺入細胞內(卵膜、細胞膜、核膜);
(2)旋轉加樣旋鈕,將樣本加入,并離開細胞。